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牛精液冷凍保存

點擊次數(shù):3623 更新時間:2017-05-05

牛精液冷凍保存是將精液進(jìn)行特殊處理,保存在超低溫下,以達(dá)到長期保存的目的。通常采用液氮(-196℃)和干冰(-79℃)保存。

牛精液冷凍保存的優(yōu)點:使用不受時間、地域以及種用雄性動物壽命的限制。可充分提高利用率。

低溫保存細(xì)胞的原理,冷凍保護(hù)劑可以均勻充分地和細(xì)胞相接觸,保護(hù)效果好。對組織而言,保護(hù)劑只能作用于其表面,對深層細(xì)胞無法起到保護(hù)作用。為了提高組織的存活率,應(yīng)同時控制降溫的速率。控制降溫速率的慢速降溫可以使細(xì)胞外溶液中的水結(jié)冰,導(dǎo)致細(xì)胞外溶液濃度升高,胞內(nèi)水向膜外滲出,在達(dá)到一定溫度時,將組織置于灤低溫冰箱或液氮中凍存,可以減輕細(xì)胞內(nèi)結(jié)晶對細(xì)胞的損傷,保持細(xì)胞的活性。

冷凍

在裝有液氮的容器上置一銅紗網(wǎng),距液氮面2厘米左右。將平衡后的精液用滴管按一定量滴于銅紗網(wǎng),滴完后一滴停3分鐘~5分鐘,當(dāng)精液顆粒顏色變白時,立即浸入液氮,并將全部顆粒取下,收集于儲精瓶或紗網(wǎng)布袋內(nèi),并做好標(biāo)記,然后立即移入液氮罐中儲存。

解凍

將預(yù)先配制好的9%檸檬酸的溶液1毫升,放入干凈的小試管中,再置于40℃左右的溫水杯中,迅速取顆粒冷凍精液1粒放入試管。輕輕搖動至化凍時,從水杯中取出試管,接著檢查精液活力,即為合格品。

重視保精、快速解凍與鏡檢

1、根據(jù)液氮罐的性能要求,定期添加液氮,罐內(nèi)盛裝凍精的提筒不能露在液氮外面。

2、取精時,盡可能用長鑷子,切勿將提筒或紗布袋提到臨界線以上處(罐頂10厘米左右)。

3、從液氮中取出細(xì)管凍精時,要輕輕甩一兩下,將塑料細(xì)管的棉塞端放入35℃~40℃的溫水中,把封口端留在水外3厘米外,待管內(nèi)精液融化一半時,立即取出備用。

4、解凍后的精液鏡檢時,精子的活力不低于標(biāo)準(zhǔn)方可用于輸精,才能確保正常受精。

5、解凍后的精液應(yīng)立即輸配,不宜停放時間過長,應(yīng)做到現(xiàn)解凍,現(xiàn)輸精。

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