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使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞樣品的具體方法是什么?程序降溫的具體步驟

點(diǎn)擊次數(shù):2959 更新時(shí)間:2017-08-01

使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞樣品的具體方法是什么?程序降溫的具體步驟

 

1.預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4冰箱保存預(yù)冷;
2.用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);
3.再次用*培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,將預(yù)冷的凍存液加入消化*的細(xì)胞中,用滴管輕輕吹打混勻。
4.在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱和凍存日期。
5.凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力

細(xì)胞凍存有兩種方法:傳統(tǒng)的方法是利用冷存管處于4、 -20 -80℃三溫區(qū)保存,程序降溫方法是利用程序降溫盒設(shè)定程序由室溫降低至-80,后再放置到液氮罐中長(zhǎng)期保存。

 

 

液氮罐與-86度超低溫冰箱保存細(xì)胞的區(qū)別?

 

首先,凍存的細(xì)胞,溫度越低,保存的時(shí)間越長(zhǎng),像哺乳類(lèi)細(xì)胞凍-80度,存放于-86度超低溫冰箱內(nèi),保存半年沒(méi)問(wèn)題,但是如果要保存時(shí)間更長(zhǎng),或者長(zhǎng)久保存,就必須要用液氮罐來(lái)儲(chǔ)存,-196度超低溫儲(chǔ)存。

細(xì)胞儲(chǔ)存液氮罐 >>

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